肝素亲和柱作为艾杰尔免疫亲和柱产品系列之一,主要应用于巴氏杀菌乳、调制乳、含乳饮料、调制乳粉及乳基婴幼儿配方食品中牛乳铁蛋白含量的测定。
产品信息
| 产品货号 |
BAC50020-12 |
| 产品名称 |
Heparin Immunoaffinity column |
| 产品描述 |
12mL, 20/Pk |
| 电商链接 |
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产品亮点
- 至纯至简:100%遵循GB 5009.299-2024前处理步骤,12 mL大体积柱管,无需辅助即可实现一步上样,保证流速,减少堵塞,让标准操作变得更加顺畅;
- 稳收双高:缓冲液添加回收率>95%,RSD<5%;
- 艾飞双行:艾杰尔肝素亲和柱+飞诺美Jupiter C4液相色谱柱的黄金搭档,轻松助力乳铁蛋白的测定。
产品参数
| 参数信息 |
国标要求 |
升级产品 |
| 凝胶装填量 |
1 mL |
1 mL |
| 柱容量 |
≥2 mg |
≥5 mg |
| 柱体积 |
无要求 |
12 mL |
| 产品流速 |
1-3 mL/min |
1-1.5 mL/min |
| 柱容量回收率 |
>95% |
>95% |
| 适用性 |
巴氏杀菌乳、调制乳、含乳饮料、调制乳粉及乳基婴幼儿配方食品 |
巴氏杀菌乳、调制乳、含乳饮料、调制乳粉及乳基婴幼儿配方食品、发酵乳等 |
- 储存条件:肝素亲和柱需在2-8℃条件下储存,不得冷冻。
- 保质期:在最佳保存温度条件下,产品有效期18个月(蛋白提取试剂有效期6个月)。
- 注意事项:为保证最佳回收率,使用前,肝素亲和柱及待检样品需于18-25℃回温。
样品前处理方法
- 称量:称取5g(精确至0.01g)巴氏杀菌乳(巴氏奶)试样于烧杯中,加标;
- 提取:加入适量磷酸盐缓冲液Ⅱ提取,分次将样品转移至25mL容量瓶,用磷酸盐缓冲液Ⅱ定容至刻度,充分混匀后转入离心管,在4℃条件下10000r/min离心8min,取样液10mL 待净化。
*肝素亲和柱使用前要恢复至室温(25℃)
- 活化:肝素亲和柱使用前先将柱中保护液放掉,后加入5.0mL 磷酸盐缓冲液Ⅱ活化;
- 上样:准确将10.0mL样液过柱,控制流速在1mL/min~3mL/min
- 淋洗:用10.0mL 磷酸盐缓冲液Ⅱ淋洗,弃去流出液,用吸水纸擦拭干净柱管内壁残留液体
- 洗脱:5.0mL磷酸盐缓冲液Ⅰ洗脱,不要抽干;
- 浓缩:收集洗脱液并用磷酸盐缓冲液Ⅰ定容至5.00mL,过0.45μm PES水相针头滤膜,上机待测。
色谱分析条件
- 色谱柱:Jupiter C4 4.6×250mm 5μm 300?;P/No: 00G-4167-E0
- 流动相:A:0.1%三氟乙酸水溶液;B:乙腈;
- 流 速:1.0 mL/min;
- 柱 温:30 ℃;
- 进样量:50 μL;
- 梯度条件:
| 时间(min) |
A% |
B% |
| 0 |
85 |
15 |
| 20 |
15 |
85 |
| 22 |
85 |
15 |
| 25 |
85 |
15 |
实验结果
标准曲线:
准确移取牛乳铁蛋白标准中间溶液,用磷酸盐缓冲液Ⅰ稀释定容,配制成浓度分别为 1.0μg/mL、5.0μg/mL、10.0μg/mL、20μg/mL、50.0μg/mL、100.0μg/mL的标准系列工作液,临用现配。以物质峰面积响应值为纵坐标,浓度为横坐标,绘制标准曲线。

实验谱图

实验数据
| 化合物 |
理论浓度 (mg/kg) |
平行次数 |
实测结果 (mg/kg) |
平均回收率 |
RSD% |
| 牛乳铁蛋白 |
100 |
第一次 |
98.9188 |
98.03% |
1.50% |
| 第二次 |
98.9450 |
| 第三次 |
96.2280 |
*注:实验数据为扣除空白后结果