Clarity OTX 寡核苷酸净化

Clarity OTX

15 分钟即可从生物样本中快速分离寡核苷酸药物

使用 Clarity OTX 固相萃取（SPE）和缓冲液产品，在更短的时间内从生物体液和组织中分离基于 RNA 和 DNA 的治疗药物/代谢物。

典型萃取回收率大于 80 %
无需液液萃取 (LLE)
针对 LC-MS 生物分析进行优化

美国专利号 7,119,145

推荐用途

从生物体液和组织中提取基于 RNA 和 DNA 的治疗剂/代谢物

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一般萃取

常见提取程序（~180 分钟）

适用于大多数寡核苷酸治疗药物和样品

Oligo types	Sample Types
DNA	Plasma
Aptamers	Serum
RNAi/siRNA	Urine
Thioates	Tears
Lipid-conjugates	Saliva
Liposome encapsulated	Tissue

提取实验方案

Sample Pre-Treatment
Tissue	Proteinase K digestion or homogenize Mix 1-to-1 with Lysis-Loading buffer
Biological Fluids	Mix 1-to-1 with Lysis-Loading buffer

检测低剂量水平

由于母体寡核苷酸治疗剂及其代谢物的典型回收率为 80% 或更高，因此可以在皮摩尔范围内进行检测。下面的 TIC 说明了在这个非常敏感的范围内检测剂量。使用 Clarity OTX 提取加标到血浆中的 500 ng 和 50 ng 等分试样，以确定灵敏度限值。500 ng 起始量的 TIC 如下所示。可以定量对应于 19 mer P-S 的 14.3 分钟峰。虽然在 50 ng 上样量的 TIC 中没有观察到峰，但在 m/z 为 944（-7 电荷态）处使用 XIC，仍然可以定量非常低水平的寡核苷酸。

血浆中的灵敏度研究

Column: Clarity 3 µm Oligo-RP C18
Dimension: 50 x 4.6 mm
Part No.: 00B-4441-E0
Mobile Phase: A: 50 mM TEAA, pH 7.5 / 5 % Acetonitrile B: Methanol
Gradient: A/B (90:10) to A/B (40:60) in 20 min
Flow Rate: 1 mL/ min
Detection: UV @ 260 nm
Sample: 25nt DNA oligonucleotide

使用 Clarity OTX 从肝组织中提取的寡核苷酸的 UV 色谱图。分析前，将 19 聚体提取的硫代磷酸酯寡核苷酸加入 10 μg 寡核苷酸内标。顶部两张色谱图代表孵育的 P-S 寡核苷酸的不同水平。底部色谱图是等量 19 聚体寡核苷酸和内标的外标。请注意，孵育样品中寡核苷酸的回收率高，血浆污染物含量低。