常见问题解答-飞诺美

与正相HPLC类似，HILIC使用传统的极性固定相（如裸硅胶、交联二醇、氨基或氰基），但流动相与反相HPLC模式相似。HILIC流动相组成与反相相同，但乙腈是主要成分，水是次要成分。因此HILIC也被称为"水合正相"。HILIC还能像离子色谱一样分析带电物质。

微洗脱SPE本质上是一种微型化的固相萃取技术。该技术特别适合样品量有限的分析工作，或希望跳过干燥步骤以节省时间的分析人员。典型样品体积为10 100μL，洗脱体积可低至25μL，通常小于150μL，因此无需进行干燥步骤。

Novum SLE吸附剂依靠传质作用将目标物从水相转移到有机洗脱溶剂中。为提高某些分析的回收率，可能需要将样品稀释比建议的1:1更高，以增加水相溶剂/样品的表面积。Novum Mini 96孔板样品最大稀释300μL，Max 96孔板最大450μL。增加洗脱溶剂用量也可提高回收率。

载气污染可能是导致流失增加的一个原因。确认的最佳方法是更换气瓶或切换至不同的气源。流失可能是由于载气中存在痕量污染物（如烃类、氧气）所致。

Rezex ROA和RHM色谱柱填充的是相同的固定相。两者的主要区别在于：ROA在酸性条件下进行质量控制测试，而RHM在中性条件下测试。ROA采用酸性条件测试是因为其设计用于有机酸分析，这些化合物在酸性条件（如5mM H2SO4缓冲液）下会呈现中性状态。

传统10mg 96孔板SPE采用200μL洗脱体积，而微洗脱96孔板仅需25μL洗脱体积。因此传统模式的样品稀释度是微洗脱板的8 15倍，这意味着微洗脱制备的更浓缩样品可使峰强度提升8 15倍。

需绘制KD与Log MW关系图： ? KD = (分析物洗脱时间排阻体积洗脱时间) / (全渗透体积洗脱时间排阻体积洗脱时间) ? Log MW为分析物分子量的对数（以10为底）

对于大分子量的多分散性聚合物，在凝胶渗透色谱(GPC)分析中可能只出现一个峰。那么如何确定聚合物的平均分子量(MW)和多分散指数呢？虽然有许多不同的软件程序可辅助计算，但关键在于使用与目标分离化合物结构最相似的分子量标准品(有多家供应商提供特定的 GPC 标准品)。通过将聚合物峰的保留时间与标准品的保留时间对比，可得出平均分子量，而峰的宽度则提供了所分析聚合物的多分散性信息。

最佳操作是将溶剂直接加入血浆（或将血浆直接加入溶剂），这种方式能实现更充分的混合效果。需注意：当进行第二次加液时，避免将移液枪头靠在孔板侧壁上操作。

Luna Omega 1.6 μm色谱柱可稳定承受1000 bar压力，5 μm规格的色谱柱可稳定承受600 bar压力。

常见问题解答

HILIC色谱与正相、反相和离子色谱有何区别？

什么是微洗脱固相萃取(SPE)？

如何提高Novum SLE的分析物回收率？

载气污染是否可能导致 GC 色谱柱流失增加？

Rezex ROA与Rezex RHM色谱柱有何区别？

微洗脱SPE与传统96孔板模式的洗脱体积有何差异？

如何进行SEC分子量校准？

如何使用Phenogel GPC色谱柱测定聚合物的分子量？

使用Impact进行蛋白沉淀时，溶剂与血浆的最佳混合方式是什么？

Luna Omega填料的耐压如何？