常见问题解答-飞诺美

具体洗脱体积请参阅Novum SLE用户指南。可分多次洗脱，例如在Novum MAX 96孔板上可使用3次600μL洗脱溶剂替代2次900μL。

1.渗透压裂解法：将3倍体积的去离子水与1倍体积全血样本混合，涡旋3 5秒，3700 rpm离心10分钟后收集上清液 2. 超声破碎法：全血样本室温超声处理15分钟，3700 rpm离心10分钟后收集上清液 3. 无机盐沉淀法：将3倍体积的0.1M硫酸锌/0.1M醋酸铵溶液与1倍体积全血混合，涡旋3 5秒，3700 rpm离心10分钟后收集上清液

需要保持高浓度水分以确保磺酸基配体处于活性电离状态。此外，有机溶剂比例过高可能导致聚合物骨架发生不可逆溶胀。

绝对回收率是指从基质中回收的分析物量与未萃取标准品的比值。该数值的稳定性至关重要，通常>65%为理想值。相对回收率是指以经过相同萃取条件的加标内标为参照，从基质中回收的分析物量。

优化发酵分析的两个主要参数是流动相浓度和柱长。为调节有机酸的保留时间，可以提高或降低酸浓度（典型为 0.005N H?SO?），从而增加或减少有机酸的保留。二元羧酸对酸浓度的变化尤其敏感（温度也可能有轻微影响）。淀粉和糖的保留时间主要与柱长相关：较短的柱子会减少糖的保留时间和分离度。醇类的保留时间同样受柱长影响，但也可以通过温度以及在流动相中添加少量有机溶剂来调节（注意：Rezex 色谱柱仅能耐受极低比例的醇类和乙腈）。

RI检测器对流速、流动相组成和温度变化敏感。确保参比池充满与方法相同的流动相，检查泵流速稳定性。若检测器有温控功能，需使其与流动相温度匹配。通常建议将色谱柱和检测器温度控制在高于环境温度以保持恒温。

示差检测器(RI)和蒸发光散射检测器(ELSD)均可使用，两者均基于折射原理。ELSD通常比RI更灵敏且支持梯度模式。也可使用能检测所有非挥发性化合物的电雾式检测器(CAD)。

由于苯基固定相的极性特性，它们可以在100%水相流动相条件下使用，无需担心疏水塌陷问题。

离子排斥柱利用软质聚苯乙烯树脂进行分离。这种软质树脂对色谱柱背压的突然变化非常敏感。因此，为了最大限度地延长 Rezex 色谱柱的使用寿命，应将色谱柱放入柱温箱并升至工作温度，然后应在一两分钟内缓慢将流速升至工作流速。同样，在关机时，应缓慢降低流速，并且在背压降至零之前不应卸下色谱柱。切勿在有压力的情况下断开色谱柱连接。

吸附剂分析物相互作用发生在孔道内部。常规聚合物和硅胶基SPE材料的平均孔径为60 85?，会限制分子量>15kDa的分子进入。分析物必须能进入孔道才能与吸附剂作用。对于分子量>15kDa的分子，可使用260 300?的大孔吸附剂。

常见问题解答

Novum SLE的推荐洗脱体积是多少？可分多次洗脱吗？

全血预处理的细胞裂解方法有哪些选择？

为什么Rezex色谱柱对有机溶剂使用量有限制？

如何测定固相萃取(SPE)中的回收率？

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糖分析可用哪些检测器？

苯基柱会出现"疏水相塌陷"吗？

使用 Rezex 色谱柱时，启动和关机操作需要注意哪些事项？

吸附剂孔径如何影响固相萃取（SPE）？