常见问题解答-飞诺美

当转换到更高效率的填料（如Kinetex）时，必须调整检测器扫描速率以适应更窄的峰宽。1Hz的扫描速率（每秒1个数据点）对20秒宽的峰足够，但对于更高效的色谱柱产生的更窄峰，必须提高检测器采集频率以避免峰顶平坦化（表现为柱效损失）。

RC、PTFE和NY滤膜在121°C最多15分钟条件下可高压灭菌。为保持最佳性能，持续工作温度不应超过80°C。只有聚丙烯外壳的Phenex过滤器可高压灭菌，MBS外壳的不可灭菌。

正确的样品预处理能显著提高萃取性能。预处理的目的是确保目标分析物处于游离状态，并形成适当的离子化/去离子化形态，以最大化与SPE吸附剂进行相互作用/保留。不恰当的预处理可能导致回收率低以及结果不可重复。对于反相方法，调节样品pH值确保目标分析物未离子化，可增强这些化合物的保留能力，同时提高方法的重复性。对于离子交换方法，确保目标化合物和吸附剂化学性质都处于离子化状态，有助于最大化离子交换相互作用。无论采用何种方法，将样品制备成对应保留模式下最弱溶剂的上样状态，都能获得更稳定、更可重复的方法结果。

阴离子选择性（低到高）： OH 、F 、丙酸根、乙酸根、甲酸根、HPO4 、IO3 、HCO3 、Cl 、NO2 、BrO3 、HSO3、CN、Br、NO3、ClO3 、HSO4 、I 、柠檬酸根、苯磺酸根阳离子选择性（低到高）： Li+、H+、Na+、NH4+、Mn2+、K+、Mg2+、Fe2+、Cs+、Zn2+、Co2+、Cu2+、Cd2+、Ni2+、Ca2+、Sr2+、Cu+、Hg2+、Pb2+、Ag+、Ba2+

ELSD检测器基线噪声的可能原因包括： ? 蒸发温度过低溶剂未完全蒸发 ? 蒸发温度过高溶剂在雾化器中沸腾 ? 空气或氮气不纯净使用气体捕集阱去除微量水分或油分 ? 气体流速过低洗脱液雾化不良，需提高气体流速 ? 洗脱液中存在非挥发性物质用挥发性缓冲盐（如乙酸铵）替代原有缓冲盐，并确保洗脱液无颗粒物

蛋白质沉淀是通过添加有机溶剂、金属离子、酸或盐等沉淀剂来改变蛋白质在溶液中的溶解度而实现的。最常用的是有机溶剂沉淀法和酸沉淀法。有机溶剂通过溶剂化蛋白质表面的疏水区域并置换水分子，导致静电相互作用增强，促使带电分子相互吸引，从而使蛋白质聚集；这会降低其溶解度，引发沉淀。酸会与蛋白质形成不溶性盐，从而导致沉淀。

当注入色谱柱的一种或多种化合物超过色谱柱固定液的容量时，就会发生峰前延。固定液膜越薄，色谱柱能保留的每种化合物就越少。为防止前延，可减少进样量、增加分流比或注入浓度较低的样品。

正确维护高效液相色谱仪（HPLC）对于 Rezex 色谱柱的使用寿命至关重要。从流体管线和洗针液中去除有机溶剂，可防止色谱柱受到高浓度有机溶剂的冲击，这种冲击可能会损坏色谱柱。同样，金属键合的 Rezex 色谱柱（RCM、RPM、RAM、RSO 和 RNM）对酸性条件和其他 HPLC 分离中使用的缓冲盐敏感。最后，对于使用离子排阻柱而言，流动相和 HPLC 系统的微生物污染始终是一个需要关注的问题。流动相应现配现用，并且应不时用有机溶剂或稀硝酸（必须要先卸下色谱柱）冲洗系统，以减少微生物污染（请参阅 HP

在HILIC色谱中，乙腈是弱洗脱溶剂，水是强洗脱溶剂。HILIC模式下溶剂的相对强度为：丙酮 < 异丙醇 < 乙腈 < 乙醇 < 二氧六环 < 二甲基甲酰胺 = 甲醇 < 水。

一般来说，水对含有化学键合聚硅氧烷固定相的毛细管色谱柱没有影响。然而，基于聚乙二醇（PEG）的固定相可能会因反复进水样而受到影响，导致色谱柱极性发生变化。对于水样进样，推荐使用Zebron ZB WAXplus气相色谱柱。该色谱柱即使用水进行溶剂冲洗，也不会改变极性或峰形。

常见问题解答

我从5μm全多孔柱切换到2.6μm Kinetex核壳柱后灵敏度下降，如何解决？

Phenex过滤器可高压灭菌吗？

为什么SPE前需要对样品进行预处理？

离子交换固相萃取（SPE）中洗脱分析物所用抗衡离子的相对选择性如何？

导致蒸发光散射检测器(ELSD)基线噪声的原因有哪些？

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