常见问题解答-飞诺美

在程序升温过程中，流速会随着柱温的升高而降低。这种降低是由于载气在较高温度下粘度增加所致。

使用TEMPS（模板介孔硅胶）技术显著降低了微孔对Luna Omega总表面积的贡献。微孔的减少使分子能更有效地进出孔结构，从而提高分离效率。

在QuEChERS方法的第二阶段，为去除更多疏水性组分，可选用以下吸附剂： ? PSA 去除有机酸 ? C18 去除脂类及其他高疏水性化合物 ? GCB 去除色素及其他平面分子（注意：若需分析平面型农药，需谨慎使用GCB，可能导致目标物损失） ? MgSO4 用于去除萃取过程第一部分残留的微量水分

传统方法建议按孔径递增顺序排列（最小孔径色谱柱最靠近进样器）。但实际操作中，只要通过实验确定并保持后续分析的一致性，串联顺序通常并不重要（但需做好方法文档记录）。

分析物在极小体积洗脱溶剂中的预浓缩过程可直接转化为更高的峰响应值，同时省去了干燥步骤。

我们关于GPC色谱柱的首要关注问题。是色谱柱的选择性。不同孔径的色谱柱具有不同的分子量分离范围，这取决于分析物的大小，可能有2或3种Phenogel色谱柱适用于该尺寸范围。如果最适合某一分子量的色谱柱不能提供最佳分离，那么高于或低于该分子量范围的色谱柱可能是更好的分离选择。您可通过Phenomenex目录或官网查询色谱柱相关信息。流速和溶剂选择也会对分离度产生影响。

另一类棘手的化合物是疏水性极强的物质，例如肽类 therapeutics（治疗性肽）。已知肽类物质对塑料器皿具有极强的亲和力，如果在干燥步骤中接触收集容器，可能会吸附在容器表面，导致极难回收以进行后续分析。而在微洗脱过程中，由于样品仅需使用极少量溶剂进行洗脱，因此无需干燥和复溶步骤。

主要影响因素包括： ? 固定相载体（如硅胶）随时间分解形成柱内空隙，导致峰展宽/分裂，降低灵敏度和分离度 ? 颗粒物积累造成压力升高 ? 中性pH下固定相配体也可能逐渐流失，导致保留时间变化和柱效降低问题样品或苛刻运行条件会显著缩短柱寿命（减少进样次数）。建议使用SecurityGuard/SecurityGuard ULTRA保护柱，或采用Phenex针式过滤器/Verex过滤瓶去除样品颗粒物来延长柱寿命。

色谱柱的顺序对分离效果至关重要，关键在于保持柱序的一致性。大多数方法通常按照从大孔径到小孔径的顺序排列色谱柱，也有一些方法采用相反的顺序。关键在于保持一致性，在每次运行时使用相同的柱序，以免改变方法的分离度。

温度通常对凝胶渗透色谱(GPC)分离影响不大，但仍需加以考虑。升高柱温有助于提高某些分析物的溶解度，这可能会改善难溶性分析物的分离度。此外，柱温升高还可降低流动相/稀释剂的粘度不匹配问题的发生概率，从而提升分离性能。需要注意的是，升高温度时必须考虑流动相溶剂的闪点或沸点。这一点有时会被忽视。切勿在接近流动相闪点的温度下进行分离。

常见问题解答

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